本发明涉及一种绵马贯众山楂组合物、其制备方法与应用。本发明组合物有效成分由如下重量份的原料制成：绵马贯众10~90份和山楂10~90份。本发明的绵马贯众山楂组合物对防治家禽病毒性疾病，尤其是法氏囊病毒所致家禽疾病，肾型传染性支气管炎病毒所致家禽肾脏疾病，禽流感病毒所致哺乳类动物甲型流感病毒病和家禽禽流感病毒病具有良好的预防和治疗效果；本发明绵马贯众山楂组合物，其原料易得且成本较低，疗效好，无残留和绿色环保等特点，可以替代化学类抗病毒药物。
1.一种治疗鸡肾型传染性支气管炎、传染性法氏囊病的药物组合物，其有效成分是由如下重量份的原料制成：绵马贯众20～80份和山楂20～80份；所述组合物的制备方法包括以下步骤：1）按重量份称取绵马贯众、山楂，并分别粉碎，用乙酸乙酯浸提，提取液减压浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；2）浸提后药渣用75%～95%乙醇浸泡，煮沸，将浸提液抽滤，减压浓缩蒸干，得到乙醇浸膏；3）将乙酸乙酯浸膏和乙醇浸膏混合，加入辅料制成剂型。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的有效成分由如下重量份的原料制成：绵马贯众40份和山楂60份。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述绵马贯众山楂组合物的剂型为颗粒剂、可溶性粉剂、片剂或口服液。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，还包括淀粉、β环糊精、乳糖、甜菊苷、蔗糖、甘草甜素、果葡糖浆、三氯蔗糖、木糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物的制备方法包括以下步骤：1）称取绵马贯众，用乙酸乙酯浸提，减压浓缩得到浸膏；药渣用75～95%乙醇浸泡，煮沸提取1～2次，合并滤液，减压浓缩蒸干得到浸膏，合并浸膏；2）称取山楂，用乙酸乙酯浸提，减压浓缩得到浸膏；药渣用75～95%乙醇浸泡，煮沸，将浸提液抽滤，减压浓缩蒸干得到浸膏，合并浸膏；3）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏混合，加入辅料制成剂型。技术领域
本发明属于医药领域，涉及一种绵马贯众山楂组合物、其制备方法与应用。
背景技术
我国动物疫病类型多、流行广泛，病毒性疫病频发给社会经济和人民生活带来严重的影响。据有关资料显示我国每年因病毒性疾病造成的直接经济损失高达200～250亿元，约相当于畜牧业总产值的2.5%～3.1%。从间接损失来看，由此造成的动物生产性能降低、畜产品品质下降、饲料消耗增加、人工浪费、防治费用增加、环境损害及相关产业的经济损失就更加巨大，估计约为发病死亡造成损失的3～5倍。畜禽病毒病发生给人类的健康乃至生存构成了极大的威胁，扰乱了人们正常的生活秩序，成为造成社会不稳定的重要因素。此外，畜禽动物病毒性疾病也严重影响我国食品安全和畜禽食品出口产业。近年来我国畜产品出口步履维艰，屡屡受阻，肉类出口仅占国内肉类总产量的1.3%，占世界肉类出口总量的3.6%。欧美为中国畜禽产品设置贸易壁垒，如1996年8月至2001年4月期间，欧盟以我国出口的禽肉中含有疫病和农药、兽药残留等为由对我国禽肉下了长达5年的禁令。虽然2001年4月，欧盟刚刚宣布了对中国肉鸡的进口解禁，韩国从我国某地出口的新鲜鸭肉中又分离到H5亚型禽流感病毒，韩国和日本先后宣布禁止进口中国禽肉产品，对欧盟的出口又重新无限期停止，导致中国出口肉鸡企业行业陷入了严重的尴尬困境，遭受了严重的经济创伤。因此，开发绿色环保型新兽药防治畜禽病毒性疾病已经成为畜禽养殖业健康发展的重要基石。绵马贯众为较常用中药始载于《神农本草经》，历代本草所记载的贯众形态、产地及附图特征表明贯众品种甚多。药典收载的绵马贯众使用地区较广，是中药常用品种之一。绵马贯众为鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨Dryopterisxa0crassirhizomaxa0Nakai的干燥根茎及叶柄残基，味苦、微寒、有小毒、归肝、胃经，具有清热解毒、驱虫等功能。现代药理研究表明具有抗病毒、驱虫、抗肿瘤、兴奋子宫、雌激素样作用等，临床用于治疗肺炎、乙型肝炎、肠道寄生虫病、妇产科出血、带状疱疹等。近年来，随着现代中药学技术发展，从该植物中分得3个间苯三酚类单体化合物：东北贯众素ABBA、绵马酸ABA和白绵马素AA，该植物地上部分还含有多种三萜类化合物。2001年又有人报道从中分离得到了4种酮苷类化合物，另外还含鞣质、挥发油、树脂等成分（高增平，2003，北京中医药大学博士论文）。绵马贯众有效成分活性报道逐渐增加：如绵马贯众的水和酒精提取物均能抑制流感病毒京科68-1株，对流感病毒和疱疹病毒为直接杀灭作用（蒋亚生，杨宁．药学实践杂志，2000，18：17）。绵马贯众在0.3~5mg/100l浓度时具有抗HBsAg的作用，同时对实验性肝损伤具有保护作用（郑民实，等．中国医院药学杂志，1991，11：53；谢云章．河北医药，1995，17：82）。也有实验证明绵马贯众具有抗艾滋病毒的作用（朱丽江．中国中医药信息杂志，1996，3：17），日本学者已从绵马贯众中分离出了具有抗艾滋病毒活性的4个黄酮类成分（Byung-Sunxa0Min，等，Pharm．Bull．2001，49：546）。此外有实验证明绵马贯众对柯萨奇B病毒和埃柯病毒有明显抑制作用(董杰德．山东中医学院学报，1993，17(4)：46)，试验显示10种主流贯众品种均有药用作用，但以绵马贯众、苏铁蕨、乌毛蕨最强，其次是狗脊蕨和荚果蕨。根据对凝血酶原时间的影响实验结果判断绵马贯众止血作用最强，其次是狗脊蕨和紫萁。近年来，绵马贯众及其组合物抗病毒发明专利层出不穷，主要分为以下几类：（1）治疗流感病毒方面：复方贯众阿司匹林片专利主要用于治疗流行性感冒（申请号CN03108749.3，公开号为CN1466981）。贯众板蓝根醋饮料具有治疗流行性感冒的功效（申请号CN200510015819.6,公开号为CN1954731）以及贯众组合物在制备治疗人流感药物中的应用（申请号：CN200910082162.3，公开号为CN10862391A）；亚宝药业集团股份有限公司申请的一种预防和治疗甲型H1N1流感的中药组合物（申请号CN200910210723.3，公开号为CN101695536A）。也有报道贯众有明确的抗甲型H1N1流感病毒的效用（申请号CN200910075211.0，公开号为CN101991694A）。（2）非典型肺炎病毒：以贯众为中药组合物作为非典型肺炎的治疗和预防用药（申请号CN03143211.5，公开号为CN1483463）；（3）病毒性心肌炎：河北以岭医药研究院有限公司申请的一种中药组合物在制备治疗病毒性心肌炎药物中毒的应用，该发明临床实验证实对治疗病毒性心肌炎具有显著疗效（申请号CN200810117306.X，公开号为CN101637533）。（4）手足口病：河北以岭医药研究院有限公司申请的一种中药组合物在制备治疗手足口病药物中的应用，该发明通过有效杀灭病毒，退热，消炎，有效治疗手足口病（申请号为CN200810117302.1，公开号为CN101637529）。（5）疱疹病毒：临床实验证实贯众提取物对治疗带状疱疹具有显著疗效（申请号为CN201010271514.2，公开号为CN102379957A）。在畜禽疾病方面的专利集中在：（1）畜禽痢疾病防治，家禽痢疾的泡腾中药组合物及其制备方法报道该配方能够有效提高免疫力，无毒副作用以及药物残留（申请号CN200910228407.9，公开号为CN101816711A）；（2）抗寄生虫方面：绵马贯众具有清热解毒，驱虫止血功能（申请号CN200510015178.4，公开号为CN1939352）；（3）禽流感防治：绵马贯众制备口服剂型对于防治家禽禽流感病毒防治效果显著，使用安全，方便（申请号CN200510011432.3，公开号为CN1682843）。随后华南农业大学申请的一种抗流感和禽流感病毒的药物（申请号为CN200610011341.4，公开号为CN1846717）；保定冀中药业有限公司申请的一种预防禽流感的中药提取物及制备方法（申请号为CN200710123069.3，公开号为CN101332255）。山楂是我国中医药学中的重要药材。山楂为蔷微科山楂属植物山里红Crataegusxa0pinnatifidaxa0bgexa0var.majorN.E.Br.或大果山楂C.pinnatifidaxa0bge的干燥成熟果实，收载于2005年版《中国药典》。山里红的果实有“北山楂、南山楂”之分，全国各地均有栽培，为药食同源植物。山楂味甘酸，性微温，归脾、胃、肝经。具有生津止渴，消积化食，活血化瘀，补脾健胃作用，临床用于食滞不化及产后瘀阻腹痛。山楂富含山楂酸、花色素、柠檬酸、酒石酸、抗坏血酸、咖啡酸、靴酸、金丝桃贰、棚皮素、牡剂素、菇烯、有机酸及黄酮类等活性物质。山楂生物活性研究：（1）促进免疫活性的提高。山楂煎剂对小鼠胸腺和脾重量、T淋巴细胞转化率、T淋巴细胞有显著促进作用（陶小萍.辽宁中医杂志，2001，(2):86；常江，等.包头医学院学报，1996，12:10-11）。山楂提取物能增强小鼠网状内皮系统吞噬能力，提高免疫低下模型小鼠的免疫脏器指数和升高外周血白细胞，说明山楂提取物能显著提高免疫功能低下小鼠机体的免疫功能，对细胞免疫和体液免疫可能均有增强作用（刘春丽，2006第四军医大学硕士学位论文）。（2）抗病毒活性：一种以油橄榄为原料制备高纯山楂酸的发明专利显示高纯山楂酸可作为制备抗肿瘤、抗病毒、抗HIV和抗心血管疾病药物的原料药（申请号为CN200810125935.2，公开号为CN101418031）；在防治肝炎病毒方面，利用山楂和香菇制备的中药组合物，可用于脂肪肝的治疗（申请号为CN200710137338.4，公开号为CN101057901）；此外，利用纯天然山楂果核提取物，可以用于制备治疗痔疮（申请号：CN03143103.8，公开号CN1457875）。在畜禽病毒病方面已经申报专利包括以下：（1）防治新城疫病毒和禽流感病毒：专利一种治疗鸡新城疫病的中药组合物及其制备方法（申请号CN201110119524.9，公开号CN102205036A），主要以黄芪、党参、仙人掌、黄连、生山楂、木香等14种药物组成，报道其治疗鸡新城疫疫病的药物有效率99%，治愈率96%。专利治疗禽感冒的中药（申请号:CN200910062932.8，公开号:CN101933998A），该专利其特征在于它由黄连、黄柏、黄芪、黄苓、麻黄、甘草、连翅、杏仁、大青叶、柴胡、鱼醒草、桔梗、桂枝、防风、白术、山楂、金银花、蟾蜍18种中药构成。本发明的优点是用本中药水煎喂患病的禽或粉碎成粉拌饲料喂患病的禽，可有效地治疗病毒性禽感冒。蛋鸭中草药添加剂及应用（申请号CN200910103647.6，公开号为CN101543260），主要成分由黄柏、杜仲、金银花、党参、山楂等23种成分，再加入碳酸氢钙、植酸酶、维生素E和蛋氨酸，能有效预防禽流感。山楂核提取物对病毒的作用及抗病毒药物的应用，该发明为首次发现山楂核的提取物对禽流感H9N2，H7N2，H6N2，H5N1和H5N2病毒以及新城疫(F4)病毒的抑制和攻毒保护作用（申请号：CN200510131943.9，公开号为CN1985907）。（2）防治传染性支气管炎：专利用于防治畜禽疾病的一种中草药制剂（申请号CN95100946.X，公开号为CN1116536），可以防治鸡，鸽等禽畜因呼吸道，大肠杆菌等引起的疾病有显著疗效。治疗鸡肾型传染性支气管炎的药物（申请号CN200610069485.5，公开号为CN1966009），本发明公开了一种治疗鸡肾型传染性支气管炎的药物，是由黄芪、金银花、白花蛇舌草、白茅根、生山楂、山药、甘草按一定重量配比组方而成，服用方便，无任何毒副作用，治愈后不易复发，服用后见效快，应用本发明药物治疗鸡肾型传染性支气管炎有效率100％，治愈率95％。（3）防治猪无名高热病：一种防治猪高热病的中草药添加剂（申请号:CN200910018731.8，公告号:CN101653494），本发明公开了一种防治猪高热病的中草药添加剂，它是由以下中草药原料组成的：黄芪、党参、生山楂、木香、金银花、板蓝根、紫锥菊、蝉蜕、蟾酥、甘草、大蒜素和仙人掌12种中药组成，预防猪高热病有效率94％，治疗有效率96％，治愈率82％。综上所述，利用绵马贯众、山楂单独制备药物已经有许多抗病毒方面的报道和专利。但是，国内外尚无关于绵马贯众和山楂进行组方，以及两种组方提取物一起配伍的报道，未见在配伍在防治畜禽病毒性疾病方面疗效的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够预防和治疗家禽、哺乳动物病毒性疾病的绵马贯众山楂组合物。本发明的另一目的是提供上述绵马贯众山楂组合物的制备方法。本发明的再一目的是提供上述绵马贯众山楂组合物在制备预防和治疗家禽、哺乳类的病毒性疾病药物中应用。本发明提供的绵马贯众山楂组合物，其有效成分由如下重量份的原料制成：绵马贯众10~90份和山楂10~90份。优选地，所述有效成分由如下重量份的原料制成：绵马贯众20~80份和山楂20~80份。更优选地，所述有效成分由如下重量份的原料制成：绵马贯众40份和山楂60份。所述绵马贯众山楂组合物为绵马贯众、山楂与常规的辅料或载体，按照常规的制剂方法制备成可溶性粉剂、颗粒剂、口服液或片剂。其中优选为颗粒剂、可溶性粉剂。所述绵马贯众山楂组合物，包括常规的药用赋形剂如淀粉、糊精、乳糖、甜菊苷、蔗糖、甘草甜素、果葡糖浆、三氯蔗糖、木糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠中的一种或几种。所述绵马贯众山楂组合物的制备方法，包括以下步骤：（1）按上述重量份称取绵马贯众、山楂，并分别粉碎成粗粉，用乙酸乙酯浸提，提取液减压浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；（2）浸提后药渣用75%~95%乙醇浸泡，煮沸，将浸提液抽滤，减压浓缩蒸干，得到乙醇浸膏；（3）将乙酸乙酯浸膏和乙醇浸膏混合。具体地，称取绵马贯众10~90份、山楂10~90份，粉碎，混合，加入4~8倍量的乙酸乙酯，浸提24~48h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，得到浸膏；药渣加4~8倍体积75~95%乙醇浸泡2~8h，煮沸1h~2h，将提取液抽滤得上清液，合并浸提液和上清液进行旋蒸，减压浓缩，得到浸膏。将两种有机溶剂得到的浸膏混合后，与常规制剂制备成可溶性粉剂、颗粒剂、片剂或口服液。所述绵马贯众山楂组合物的另一种制备方法，包括以下步骤：（1）称取绵马贯众，用乙酸乙酯浸提，减压浓缩得到浸膏；药渣用75~95%乙醇浸泡，煮沸提取1~2次，合并滤液，减压浓缩蒸干得到浸膏；合并浸膏；（2）称取山楂，用乙酸乙酯浸提，减压浓缩得到浸膏；药渣用75~95%乙醇浸泡，煮沸，将浸提液抽滤，减压浓缩蒸干得到浸膏，合并浸膏；（3）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏混合。具体地，绵马贯众提取物制备：称取10~90重量份绵马贯众，粉碎，用4~8倍体积乙酸乙酯浸泡24~48h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣加入4~8倍75~95%乙醇浸泡2~8h，煮沸提取1~2h，提取1~2次，合并滤液，将上述滤液旋转蒸发，减压浓缩得到浸膏。将2次收集的浸膏混合备用。山楂提取物制备：称取10~90重量份山楂，粉碎，用4~8倍体积乙酸乙酯浸泡24~48h后，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣用4~8倍体积75~95%乙醇浸泡2~8h后，煮沸提取1~2h，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用，合并上清液，减压浓缩得到浸膏；将2次提取物浸膏混合备用。将乙酸乙酯浸膏和乙醇浸膏混合，与常规制剂制备成可溶性粉剂、颗粒剂、片剂或口服液。所述绵马贯众山楂组合物的制剂可应用于制备预防和治疗畜禽病毒性疾病或细菌性疾病药物。其中，畜禽病毒包括禽流感病毒、法氏囊病毒和肾型传染性支气管炎。禽流感病毒为H5、H9亚型禽流感病毒；法氏囊病毒为BCLX株；肾型传染性支气管炎为毒株。上述制剂按照每天100mg/kg~400mg/kg体重对家禽、哺乳动物给药，连续4~5天。本发明的绵马贯众山楂组合物可以用于畜禽养殖业的病毒性疾病的防治，弥补畜禽疫苗免疫保护不足、以及免疫失败、毒株毒力增强造成的病毒病爆发和散发，为畜禽养殖提供技术支撑，提高我国畜禽养殖业产品出口的竞争力。本发明的绵马贯众山楂组合物，其原料易得且成本较低，疗效好，无残留和绿色环保等特点，可以替代化学类抗病毒药物。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1本发明颗粒剂的制备（1）称取绵马贯众4g，山楂6g，并分别粉碎成粗粉。（2）取步骤（1）制得的绵马贯众粗粉，用4倍体积乙酸乙酯浸泡24h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣加入4倍75%乙醇浸泡2h，煮沸提取1h，提取2次，合并滤液，将上述滤液旋转蒸发，减压浓缩得到浸膏。将2次收集的浸膏混合备用。（3）取步骤（1）制得的山楂粗粉，用4倍体积乙酸乙酯浸泡24h后，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣用4倍体积75%乙醇浸泡2h后，煮沸提取2h，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用，合并上清液，减压浓缩得到浸膏；将2次提取物浸膏混合备用。（4）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏混合。（5）取浸膏：蔗糖：β环糊精=1:1:2充分混合，通过湿法制粒方式制备颗粒，烘干和整粒，得到绵马贯众颗粒。实施例2本发明可溶性粉剂的制备（1）称取绵马贯众4g，山楂6g，并分别粉碎成粗粉。（2）取步骤（1）制得的绵马贯众粗粉，用6倍体积乙酸乙酯浸泡48h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣加入4倍85%乙醇浸泡4h，煮沸提取2h，提取2次，合并滤液，将上述滤液旋转蒸发，减压浓缩得到浸膏。将2次收集的浸膏混合备用。（3）取步骤（1）制得的山楂粗粉，用6倍体积乙酸乙酯浸泡48h后，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣用4倍体积95%乙醇浸泡4h后，煮沸提取2h，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用，合并上清液，减压浓缩得到浸膏；将2次提取物浸膏混合备用。（4）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏置于100ml容器中，加入正己烷5ml、吐温-20溶液5ml，制备成绵马贯众山楂溶液20ml；同时，称取4gxa0β环糊精溶解于水；将绵马贯众山楂溶液、β环糊精溶液混合，在3000转/分钟搅拌3~5min；烘干后粉碎，得到绵马贯众山楂粉剂。实施例3本发明片剂的制备（1）称取绵马贯众5g，山楂5g，并分别粉碎成粗粉。（2）取步骤（1）制得的绵马贯众粗粉，用8倍体积乙酸乙酯浸泡24h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣加入8倍95%乙醇浸泡2h，煮沸提取1h，提取2次，合并滤液，将上述滤液旋转蒸发，减压浓缩得到浸膏。将2次收集的浸膏混合备用。（3）取步骤（1）制得的山楂粗粉，用8倍体积乙酸乙酯浸泡24h后，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣用8倍体积95%乙醇浸泡2h后，煮沸提取2h，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用，合并上清液，减压浓缩得到浸膏；将2次提取物浸膏混合。（4）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏混合。（5）取浸膏：β环糊精=1:4充分混合，通过湿法制粒方式制备颗粒，干燥，压制成片。实施例4本发明口服液的制备（1）称取绵马贯众2g，山楂8g，并分别粉碎成粗粉。（2）取步骤（1）制得的绵马贯众粗粉，用4倍体积乙酸乙酯浸泡24h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣加入4倍95%乙醇浸泡2h，煮沸提取1h，提取2次，合并滤液，将上述滤液旋转蒸发，减压浓缩得到浸膏。将2次收集的浸膏混合备用。（3）取步骤（1）制得的山楂粗粉，用4倍体积乙酸乙酯浸泡24h后，回收乙酸乙酯，获得浸膏；药渣用4倍体积75%乙醇浸泡2h后，煮沸提取2h，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用，合并上清液，减压浓缩得到浸膏；将2次提取物浸膏混合备用。（4）取绵马贯众提取物和山楂提取物浸膏置于100ml容器中，加入正己烷5ml、吐温-20溶液5ml，制备成绵马贯众山楂口服液20ml。实施例5本发明颗粒剂的制备颗粒剂的另一种制备方法：称取绵马贯众1g、山楂9g，粉碎，混合，加入8倍量的乙酸乙酯，浸提48h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，得到浸膏；药渣加4倍体积95%乙醇浸泡8h，煮沸2h，将提取液抽滤得上清液，合并浸提液和上清液进行旋蒸，减压浓缩，得到浸膏。将两种有机溶剂得到的浸膏混合。取浸膏：蔗糖：β环糊精=1:1:2充分混合，通过湿法制粒方式制备颗粒，混干，得到复方绵马贯众颗粒。实施例6本发明可溶性粉剂的制备可溶性粉剂的另一种制备方法：称取绵马贯众5g、山楂5g，粉碎，混合，加入8倍量的乙酸乙酯，浸提48h，收集浸提液，回收乙酸乙酯，得到浸膏；药渣加8倍体积95%乙醇浸泡8h，煮沸2h，将提取液抽滤得上清液，合并浸提液和上清液进行旋蒸，减压浓缩，得到浸膏1.7~2.4g。将两种有机溶剂得到的浸膏混合置于100ml容器中，加入95%酒精20ml、吐温-20溶液20ml，制备成绵马贯众山楂溶液40ml；同时，称取4gβ环糊精溶解于水；将绵马贯众山楂溶液、β环糊精溶液混合，在3000转/分钟搅拌3~5min；烘干后粉碎，得到复方绵马贯众山楂可溶性粉剂。实施例7本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众9g、山楂1g。实施例8本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众8g、山楂2g。实施例9本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众7g、山楂3g。实施例10本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众6g、山楂4g。实施例11本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众5g、山楂5g。实施例12本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众3g、山楂7g。实施例13本发明颗粒剂的制备按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：绵马贯众2g、山楂8g。以下通过试验例进一步说明本发明所述组合物的药效作用。试验例1不同配比组合物治疗鸡肾型传染性支气管炎效果试验1材料和方法1.1实验动物：21日龄SPF雏鸡随机分为11组，每组10只，共计110只。1.2药物分组：贯众山楂9：1组（实施例7）、贯众山楂8：2组（实施例8）、贯众山楂7：3组（实施例9）、贯众山楂6：4组（实施例10）、贯众山楂5：5组（实施例11）、贯众山楂4:6（实施例1），贯众山楂3:7（实施例12），贯众山楂2:8（实施例13），贯众山楂1:9（实施例5）、黄芪多糖对照组和感染对照组。以上药物1-10组均给予药物200mg/kg体重。黄芪多糖粉，购自北京生泰尔生物科技有限公司，批号20100605。1.3毒株和攻毒：传染性支气管病毒BJ1株，西北农林大学王晶钰副教授赠送（王晶钰，等.鸡肾型传染性支气管炎病毒18株的分离及鉴定.中国兽医杂志，2006，42：19-20）。10日龄SPF鸡胚的ELD₅₀为107.0/0.2ml。10日龄SPF鸡LD₅₀=103ELD₅₀/0.2ml。每只雏鸡点眼、滴鼻共0.2mL。攻毒后观察鸡精神状况，待发病三分之一时，开始用药，连续使用5天。1.4评价指标：临床发病特点和体重：试验期间每天观察试验鸡的精神、食欲、活动及粪便情况，并做好记录，在试验开始和结束时，将试验鸡逐只称重，计算相对增重率。肾脏病理学变化：给药5天后，继续观察3天后，存活鸡只实施安乐死，测定肾脏肿胀数目/观察肾脏。表1组合物和药物用量情况xa0xa0组别
xa0xa0药物制备法
xa0xa0鸡只
xa0xa0剂量（mg/Kg）
xa0xa0给药方式
xa0xa0贯山9：1
xa0xa0实施例7
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山8：2
xa0xa0实施例8
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山7：3
xa0xa0实施例9
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山6：4
xa0xa0实施例10
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山5：5
xa0xa0实施例11
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山4：6
xa0xa0实施例1
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山3：7
xa0xa0实施例12
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山2:8
xa0xa0实施例13
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0贯山1:9
xa0xa0实施例5
xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0黄芪多糖对照

xa0xa010
xa0xa0200
xa0xa0口服给药5天
xa0xa0感染对照

xa0xa010
xa0xa0生理盐水
xa0xa0口服给药5天
2实验结果:2.1不同组合物对体重和成活率的影响不同组合物相对增重率分别为45.8%、63.9%、69.1%、81.9%、48.6%、95.8%、83.3%、44.4%和47.2%。与黄芪多糖对照组（62.5%相比，可以发现贯众山楂6：4组（实施例10）、贯众山楂4：6组（实施例1）、贯众山楂3:7（实施例12）均出现显著性差异（P<0.01）。结果见表2。表2组合物对鸡只体重的影响ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>注：平均增重=试验后体重-试验前体重;相对增重率=试验组平均增重/感染对照组平均增重×100%。在成活率方面，结果见表3。与黄芪多糖为参照对象，超过黄芪多糖成活率的组合为：贯众山楂4：6组（实施例1）90.0%、贯众山楂3：7组（实施例12）80.0%；接近黄芪多糖组的组合物为贯众山楂6：4组（实施例10），结果见表3。从肾脏肿胀率方面进行考察，肿胀率低于或接近40%的主要有贯众山楂6：4组（实施例10）、贯众山楂5：5组（实施例11）和贯众山楂4：6组（实施例1），结果见表3。表3药物组合物对人工感染后成活率和病变影响xa0xa0组别
xa0xa0鸡只
xa0xa0存活数
xa0xa0存活率%
xa0xa0肾脏肿胀率%
xa0xa0实施例7
xa0xa010
xa0xa02
xa0xa020.0
xa0xa050.0
xa0xa0实施例8
xa0xa010
xa0xa01
xa0xa010.0
xa0xa0100.0
xa0xa0实施例9
xa0xa010
xa0xa06
xa0xa060
xa0xa066.6
xa0xa0实施例10
xa0xa010
xa0xa07
xa0xa070
xa0xa040.0
xa0xa0实施例11
xa0xa010
xa0xa06
xa0xa060.0
xa0xa033.3
xa0xa0实施例1
xa0xa010
xa0xa09
xa0xa090.0
xa0xa022.2
xa0xa0实施例12
xa0xa010
xa0xa08
xa0xa080.0
xa0xa037.5
xa0xa0实施例13
xa0xa010
xa0xa06
xa0xa060.0
xa0xa050.0
xa0xa0实施例5
xa0xa010
xa0xa05
xa0xa050.0
xa0xa060.0
xa0xa0黄芪多糖对照
xa0xa010
xa0xa07
xa0xa070.0
xa0xa042.8
xa0xa0感染对照
xa0xa010
xa0xa04
xa0xa040.0
xa0xa075.0
xa0xa0健康对照
xa0xa010
xa0xa010
xa0xa0100.0
xa0xa00
注：存活肾脏肿胀数/观察肾脏数量x1003结论：人工感染SPF鸡肾型传染性支气管炎病毒后，成功复制了典型的肾型传染性支气管炎模型。综合体重率、成活率和肾脏肿胀三个方面的指标，贯众山楂4：6组（实施例1）疗效最好，以下试验中均以此组合物进行深入研究。试验例2组合物治疗鸡肾型传染性支气管炎效果目的：评价组合物颗粒剂治疗人工感染的肾型传染性支气管炎1材料和方法1.1实验动物：21日龄雏鸡随机分为6组，每组15只。1.2药物分组：组合物颗粒高剂量组（400mg/kg）、中剂量组（200mg/kg）、低剂量组（100mg/kg）、感染对照组、黄芪多糖对照组和感染对照。黄芪多糖粉，购自北京生泰尔生物科技有限公司，批号20100605；实施例1制备颗粒剂为试验药物。1.3毒株和攻毒：传染性支气管病毒BJ1株，西北农林大学王晶钰副教授赠送（王晶钰，等.鸡肾型传染性支气管炎病毒18株的分离及鉴定.中国兽医杂志，2006，42：19-20）。10日龄SPF鸡胚的ELD₅₀为107.0/0.2ml。10日龄SPF鸡LD₅₀=103ELD₅₀/0.2ml。每只雏鸡点眼、滴鼻共0.2mL。攻毒后观察鸡精神状况，待发病三分之一时，开始用药，连续使用5天。1.4评价指标：1.4.1临床发病特点和体重：试验期间每天观察试验鸡的精神、食欲、活动及粪便情况，并做好记录，在试验开始和结束时，将试验鸡逐只称重，计算相对增重率。1.4.2肾脏眼观病变的指标：用药结束后第7天，利用安乐死方式处死存活鸡只。剖检，并逐个观察肾和支气管的病变情况。重点观察肾脏病变，是否肿大出血，呈花斑肾，是否出现白色尿酸盐沉积。肾脏病变指数为：1分-单侧单列肾脏肿胀；2分-单侧2列肾脏肿胀；3分-单侧3列肾脏肿胀；4分-双侧2列肾脏肿胀；6分-双侧3列肾脏肿胀。表4试验分组及药物用量情况xa0分组
xa0xa0鸡只
xa0xa0剂量（mg/kg）
xa0xa0给药方式
xa0实施例1高剂量组

xa0xa015

xa0xa0400mg/kg

xa0xa0攻毒后，连续口服给药5天

xa0实施例1中剂量组
xa0xa015
xa0xa0200mg/kg
xa0xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0实施例1低剂量组
xa0xa015
xa0xa0100mg/kg
xa0xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0黄芪多糖组
xa0xa015
xa0xa00.1g/只
xa0xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0感染对照组
xa0xa015
xa0xa0-
xa0xa0感染，不给药
xa0空白对照组
xa0xa015
xa0xa0-
xa0xa0不感染，不给药
2实验结果2.1绵马贯众山楂不同剂量对SPF鸡增重率的影响在增重率方面，绵马贯众山楂高剂量组、中剂量组、低剂量组分别为45.8%、126.9%和69.0%，统计学分析显示中剂量组显著性高于高剂量组和低剂量组（P<0.05），极显著性高于黄芪多糖组（P<0.01）。结果见表5.表5试验分组及药物用量情况ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>注：平均增重=试验后体重-试验前体重;相对增重率=试验组平均增重/感染对照组平均增重×100%。2.2不同组方对成活率和肾脏病变的影响在成活率方面，从表6可以看出，绵马贯众山楂高剂量组、中剂量组、低剂量组分别为80.0%、93.3%和86.6%，黄芪多糖对照组和感染对照组分别为66.6%和53.3%。统计学分析发现，高剂量组和低剂量组差异不显著，但中剂量组显著性高于高、低剂量组和黄芪多糖对照组。此外，剖检后绵马贯众山楂高剂量组、中剂量组、低剂量组三个剂量组肾脏病变指数分别为6.5，4.1和5.9，显著性低于黄芪多糖组肾脏病变指数8.5。表6药物口服后对成活率和肾脏病理学变化影响ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>3结论：绵马贯众山楂以200mg/kg口服5天可以有效治疗鸡肾型传染性支气管炎病毒引起的感染，效果优于250mg/kg的黄芪多糖。试验例3组合物对SPF人工感染法氏囊病毒的治疗验证效果目的：检验绵马贯众山楂颗粒对人工感染法氏囊病毒的治疗效果1材料和方法1.1动物：21日龄雏鸡随机分为6组，每组15只。1.2感染毒株和剂量:人工感染毒株IBDVxa0LX株（北京市农业科学院畜牧兽医研究所），组织匀浆液每只雏鸡点眼、滴鼻共0.2mL。24h后开始用药，连续使用5天。1.3药物分组和给药方式：分为6组：病毒感染组、空白对照组、黄芪多糖对照组（即阳性药物对照组）、绵马贯众山楂高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组10-15只24日龄的SPF鸡。给药方式：饮水方式给药；见表4。绵马贯众山楂高剂量组，给予实施例1的颗粒剂，400mg/kg；绵马贯众山楂中剂量组，给予实施例1的颗粒剂，200mg/kg；绵马贯众山楂低剂量组，给予实施例1的颗粒剂，100mg/kg；黄芪多糖组，给予黄芪多糖，250mg/kg；病毒感染组，给予稀释液（0.9%生理盐水溶液）组，只攻毒，不给药；空白对照组：不攻毒，也不给药。1.4评价指标：1.4.1成活率和体重增重指标：试验期间，每天观察试验鸡的精神、食欲、活动及粪便情况，并做好记录，在试验开始和结束时，将试验鸡逐只称重，计算相对增重率。相对增重率=（试验组后体重-试验前体重）/空白对照组试验前后体重差×100%。1.4.2病变指数评价：用药结束后5天剖检，观察胸肌腿肌病变情况，测定法氏囊重量，测定其病变指数。表7试验分组及药物用量情况xa0分组
xa0xa0鸡只
xa0xa0剂量（mg/kg）
xa0给药方式
xa0实施例1高剂量组
xa0xa015
xa0xa0400mg/kg
xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0实施例1中剂量组
xa0xa015
xa0xa0200mg/kg
xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0实施例1低剂量组
xa0xa015
xa0xa0100mg/kg
xa0攻毒后，连续口服给药5天
xa0黄芪多糖粉
xa0xa015
xa0xa00.5mL/只
xa0肌肉注射，连续2天
xa0感染对照组
xa0xa015
xa0xa00.2mL/只
xa0感染，不给药
xa0空白对照组
xa0xa010
xa0xa0-
xa0不感染，不给药
2结果2.1人工感染法氏囊后药物治疗对鸡体重的影响结果见表8，绵马贯众山楂颗粒高剂量、中剂量组和低剂量组增重率分别为85.2%、88.8%和79.6%，黄芪多糖对照组为76.3%，经过统计学分析，绵马贯众山楂颗粒中剂量组显著性高于低剂量组和黄芪多糖组，但与高剂量组相比，差异不显著。2.2人工感染法氏囊后药物对鸡内脏病理学指数的影响人工感染法氏囊强毒株LX后，感染鸡只36h后出现症状，包括缩颈、闭眼、呆立不动和拉白色稀便。攻毒后48h出现死亡，96h达到死亡高峰。绵马贯众山楂颗粒高剂量、中剂量组和低剂量组成活率分别为80.0%、86.6%和80.0%，黄芪多糖组为66.6%。统计学分析显示绵马贯众山楂颗粒三个剂量组之间差异不显著，但显著性高于黄芪多糖组。结果见表9。在靶器官-法氏囊病理学变化方面，绵马贯众山楂颗粒高、中、低剂量组病变抑制率分别为66.6%、73.3%和60.0%，显著性高于黄芪多糖组（50.0%）。综上所述，本发明的实施例1的绵马贯众山楂颗粒能降低法氏囊病变指数，提高存活率以及提高增重，显示出一定的抗法氏囊效果。表8组合物治疗法氏囊感染体重变化情况ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>表9组合物治疗后成活率和病变指数结果ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>注：法氏囊病变指数：严重出血4分；中度3分；轻度1分；相对病变减少率=（感染对照-实验组病变指数）/感染对照组病变指数×100%3、结论：绵马贯众山楂以200mg/kg体重连续口服5天，可以有效的提高人工感染法氏囊鸡的存活率，提高相对增重率，减少病变指数。可以替代黄芪多糖防治法氏囊病毒的感染。试验例4组合物治疗人工感染SPF鸡禽流感病毒H5N1治疗试验目的：确定绵马贯众山楂组合物是否具有治疗禽流感H5N1效果1材料和方法1.1实验动物：5周龄SPF鸡90只，购自济南斯帕法斯家禽有限公司。饲养在负压隔离器中。1.2药物分组：组合物高剂量组、组合物中剂量组、组合物低剂量组、黄芪多糖组、感染对照组和空白对照组。金刚烷胺对照组，含量99%，购自Johnsonxa0Mattheyxa0Company,USA,Lot:10118375。各剂量组药物剂量见表7。表10试验分组及处理xa0xa0分组
xa0xa0数量（只）
xa0xa0给药浓度
xa0xa0给药途径
xa0xa0给药次数
xa0xa0实施例2高剂量组
xa0xa015
xa0xa0400mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0实施例2中剂量组
xa0xa015
xa0xa0200mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0实施例2低剂量组
xa0xa015
xa0xa0100mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0金刚烷胺对照组
xa0xa015
xa0xa0250mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0病毒对照组
xa0xa015
xa0xa00
xa0xa0-
xa0xa0-
xa0xa0空白对照组
xa0xa015
xa0xa00
xa0xa0-
xa0xa0-
1.3毒株和攻毒禽流感A/Chicken/Hebei/126/2005(Hexa0Guimei,等.Amantadine-resistancexa0amongxa0H5N1xa0avianxa0influenzaxa0virusesxa0isolatedxa0inxa0Northernxa0China.Antiviralxa0Research，2008,77：7276）。将病毒稀释至10-5，鼻腔给予0.1ml，有30%出现打蔫后开始给药，连续用药使用5天。1.4评价指标：1.4.1成活率和体重增重指标：试验期间，每天观察试验鸡的精神，食欲，活动情况，做好记录。在试验开始和结束时，将试验鸡称重。计算相对增重率，成活率。1.4.2病毒分离率：在攻毒后第9天，存活的鸡只实施安乐死，无菌采取鸡肝脏、肺脏，接种9-10日龄SPF鸡胚，测定其病毒含量。2结果2.1组合物对SPF鸡人工感染禽流感的体重影响通过滴鼻感染后，人工感染禽流感H5N1亚型后，组合物高剂量组、中剂量组和低剂量组相对增重率分别为44.0%、57.38%和16.8%，黄芪多糖对照组为30.1%。统计学分析组合物中剂量组显著性高于高剂量组和金刚烷胺对照组（P<0.05），极显著性高于低剂量组（P<0.01）。表11组合物治疗试验中SPF鸡增重率的影响ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>2.2组合物对SPF鸡人工感染禽流感存活率和存活时间的影响人工感染强毒后组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组成活率分别为73.3%、80.0%和73.3%，黄芪多糖对照组为53.3%。在存活时间上，组合物三个剂量组平均存活时间为7.9天、8.5天和8.4天，金刚烷胺对照组为6.3天。表12组合物对人工感染SPF鸡成活率和存活时间的影响ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>2.3组合物对SPF鸡人工感染禽流感肺脏和肝脏组织病毒分离人工感染强毒后组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组肺脏病毒含量分别102.2ELD₅₀/0.1ml、101.2ELD₅₀/0.1ml和101.9ELD₅₀/0.1ml，肝脏病毒含量为102.1ELD₅₀/0.1ml、100.9ELD₅₀/0.1ml和102.4ELD₅₀/0.1ml。显然肺脏和肝脏组织中病毒残留量显著性低于金刚烷胺对照组。表13组合物对肺脏组织病毒分离率的影响xa0分组
xa0xa0数量
xa0xa0肺脏病毒含量
xa0xa0肝脏病毒含量
xa0实施例2高剂量组
xa0xa05
xa0xa0102.2ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0102.1ELD₅₀/0.1ml
xa0实施例2中剂量组
xa0xa05
xa0xa0101.2ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0100.9ELD₅₀/0.1ml
xa0实施例2低剂量组
xa0xa05
xa0xa0101.9ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0102.4ELD₅₀/0.1ml
xa0金刚烷胺对照组
xa0xa05
xa0xa0104.3ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0104.1ELD₅₀/0.1ml
xa0病毒对照组
xa0xa05
xa0xa0105.7ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0106.3ELD₅₀/0.1ml
xa0空白对照组
xa0xa05
xa0xa00
xa0xa00
3结论：本试验结果显示人工感染高致病性禽流感后，组合物以200mg/kg口服SPF鸡，连续口服5天，鸡只的存活率达到80%，显著性高于金刚烷胺对照组。试验例5组合物对BALB/C小鼠H5N1流感病毒的治疗试验目的：确定组合物是否具有治疗小鼠禽流感H5N1效果1材料和方法1.1动物：18g~22g雄性、雌性BALB/C小鼠各60只，随机分为6组，每组20只，其中雌雄各10只。1.2感染毒株和剂量:人工感染H5N1A/Chicken/Hebei/126/2005(Hexa0Guimei,等.Amantadine-resistancexa0amongxa0H5N1xa0avianxa0influenzaxa0virusesxa0isolatedxa0inxa0Northernxa0China.Antiviralxa0Research，2008,77：72-76）。鸡胚ELD50尿囊液点眼、滴鼻共0.2mL。有三分之一发病后开始给药，连续使用5天。1.3药物分组:组合物高剂量组、中剂量组和低剂量组、金刚烷胺对照组，感染对照组和空白对照组。随机每组20只小鼠，具体分组情况及处理如表14所示。表14试验分组及处理xa0xa0分组
xa0xa0数量（只）
xa0xa0给药浓度
xa0xa0给药途径
xa0xa0给药次数
xa0xa0实施例2高剂量组
xa0xa020
xa0xa0400mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0实施例2中剂量组
xa0xa020
xa0xa0200mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0实施例2低剂量组
xa0xa020
xa0xa0100mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0金刚烷胺对照组
xa0xa020
xa0xa050mg/kg
xa0xa0口服
xa0xa02/天
xa0xa0病毒对照组
xa0xa020
xa0xa00
xa0xa0-
xa0xa0-
xa0xa0空白对照组
xa0xa020
xa0xa00
xa0xa0-
xa0xa0-
1.4评价指标：1.4.1临床指标：分别称取每只小鼠的初始体重和末体重；观察发病率和死亡率；用药结束后5天后剖检，取肺，并逐个观察肺，肝病变情况。相对增重率=相对增重/健康对照体重增重×100%；平均存活时间=总的存活天数/只数1.4.2存活小鼠肺脏、肝脏禽流感病毒含量：每个组分别无菌取5只小鼠的肝脏、肺脏，分别进行研磨，研磨离心液加入庆大霉素，4000单位/ml，37℃作用30分钟；做滴度稀释（10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5）接种，每个稀释度接种3枚鸡胚，连续120h观察鸡胚存活，记录死亡鸡胚数量；120h后，收集存活鸡胚的尿囊液，测定其凝集红细胞特点。2实验结果2.1人工感染禽流感后对小鼠体重的影响从增重率来看，绵马贯众高、中剂量组和低剂量组相对增重率分别为20.7%、68.1%和85.6%，金刚烷胺对照组为41.4%，经过统计学分析，绵马贯众山楂中剂量和低剂量组显著高于金刚烷胺对照组（P<0.05），极显著性高于高剂量组（P<0.01），但是，绵马贯众中剂量组、低剂量组相比，差异不显著。表15组合物对小鼠增重的影响xa0分组
xa0xa0初体重（g）
xa0xa0末体重（g）
xa0相对增重(g)
xa0xa0相对增重率(%)
xa0实施例2高剂量
xa0xa014.23±0.90
xa0xa014.75±3.12
xa00.52
xa0xa020.7^a
xa0实施例2中剂量
xa0xa014.20±1.07
xa0xa015.91±4.13
xa01.71
xa0xa068.1^b
xa0实施例2低剂量
xa0xa013.10±0.75
xa0xa015.25±2.19
xa02.15
xa0xa085.6^b
xa0金刚烷胺组
xa0xa014.10±1.08
xa0xa015.14±1.61
xa01.04
xa0xa041.4^c
xa0感染对照
xa0xa013.38±0.83
xa0xa013.05±1.63
xa0-0.33
xa0xa0-13.1
xa0空白对照
xa0xa014.16±0.22
xa0xa016.67±0.7
xa02.51
xa0xa0100.0
2.2人工感染禽流感后对小鼠成活率和存活时间的影响从表16可以看出，组合物高、中剂量组和低剂量组、金刚烷胺对照，感染对照、空白对照成活率分别为70.0%、85.0%和80.0%，金刚烷胺为55.0%。从平均存活时间上，组合物高、中剂量组和低剂量组分别为8.2、9.2和8.5天，显著性优于金刚烷胺对照组（6.5天）。表16组合物对小鼠成活率和平均存活时间的影响ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>2.3人工感染禽流感后对小鼠的肺脏指数的影响表17显示组合物对BALB/c小鼠人工感染H5N1病毒模型鼠肺重和肺病变指数的影响：组合物高剂量组、中剂量组和低剂量组肺脏指数分别为0.88%、0.69%和0.92%，显著性低于金刚烷胺对照组。但组合物高剂量组、低剂量组之间差异不显著。表17组合物对小鼠肺脏指数的影响xa0xa0分组
xa0xa0测定数量（只）
xa0xa0肺脏重量(g)
xa0xa0肺脏指数（%）
xa0xa0实施例2高剂量
xa0xa08
xa0xa00.13±0.013
xa0xa00.88±0.05
xa0xa0实施例2中剂量
xa0xa08
xa0xa00.11±0.007
xa0xa00.69±0.12
xa0xa0实施例2低剂量
xa0xa08
xa0xa00.14±0.007
xa0xa00.92±0.08
xa0xa0金刚烷胺对照组
xa0xa08
xa0xa00.18±0.014
xa0xa01.18±0.11
xa0xa0感染对照
xa0xa08
xa0xa00.26±0.024
xa0xa01.99±0.13
xa0xa0空白对照
xa0xa08
xa0xa00.11±0.007
xa0xa00.66±0.03
注：肺指数=肺重/体重；同一列中小写字母标识不同为差异显著(P<0.05)，同一列中大写字母标识不同为差异极显著（P<0.01）,同一列中字母标识相同为差异不显著（P>0.05）.2.4给药后小鼠的肺脏和肝脏禽流感病毒测定人工感染小鼠高致病性禽流感后，组合物高剂量组、中剂量组、低剂量组肺脏病毒含量分别100.2ELD₅₀/0.1ml、100.3ELD₅₀/0.1ml和100.9ELD₅₀/0.1ml，肝脏病毒含量为100.5ELD₅₀/0.1ml、100.2ELD₅₀/0.1ml和100.6ELD₅₀/0.1ml。显然肺脏和肝脏组织中病毒残留量显著性低于金刚烷胺对照组（103.1ELD₅₀/0.1ml）。结果见表18。表18组合物对小鼠肺脏组织病毒分离率的影响xa0分组
xa0xa0数量
xa0xa0肺脏病毒含量
xa0xa0肝脏病毒含量
xa0实施例2高剂量组
xa0xa05
xa0xa0100.2ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0100.5ELD₅₀/0.1ml
xa0实施例2中剂量组
xa0xa05
xa0xa0100.3ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0100.2ELD₅₀/0.1ml
xa0实施例2低剂量组
xa0xa05
xa0xa0100.9ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0100.6ELD₅₀/0.1ml
xa0金刚烷胺对照组
xa0xa05
xa0xa0102.5ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0103.1ELD₅₀/0.1ml
xa0病毒对照组
xa0xa05
xa0xa0103.3ELD₅₀/0.1ml
xa0xa0104.3ELD₅₀/0.1ml
xa0空白对照组
xa0xa05
xa0xa00
xa0xa00
3结论：组合物以200mg/kg体重口服，连续5天，可以有效提高禽流感感染后小鼠的成活率，同时可以降低病毒在肺脏和肝脏组织的感染。